服務列表

1.技術優勢：

*靈敏度高，可以檢測低拷貝的目的基因

*高精度，PCR擴增階段包罗3個階段：指數增長期，線性增長期宁静台期，96個重複指數增長期表現出高精度，而平台期則變化差異較大

*定量能力強，簡單的流程就能得到高質量的定量數據

*動力學範圍寬，可以精確定量9個數量級的差異，速度快，節省時間和勞力，不需要電泳檢測
*宁静，使用熒光染料發光，不消EB或放射性物質，極大低落對實驗人員康健的威脅
*重複性好

2.服務流程
PCR引物、探針設計合成調試→標准品制作→樣本核酸抽提反轉錄→PCR擴增檢測→數據彙總开端阐发

溫馨提示：下單流程

捷瑞網站首頁→订单下载→下载熒光定量PCR服務订单→填写完整实验信息→发送至support@generay.com.cn

3.檢測要领

   (1) SYBR Green Ⅰ

   游离状态下的SYBR Green分子发出微弱的荧光信号，当与dsDNA双螺旋小沟区域结适时，则发出绿色荧光，可在520nm波长下检测荧光信号，荧光信号的强度与dsDNA数量呈正相关。

SYBR Green Ⅰ染料法的特點：

   高靈敏度，低配景信號，操纵簡單，不影響酶促反應，價格自制。

(2)探針法：TaqMan熒光探針，MGB探針

  TaqMan 荧光探針是一种寡核苷酸探針，荧光基团连接在探針的5`末端，一般用FAM、VIC、HEX、Cy3、Cy5等荧光基团，而淬灭剂则在3`末端，一般为TAMRA、BHQ1、BHQ2等，其中TAMRA发出黄色荧光，BHQ1和BHQ2不发出荧光。PCR扩增时在参加一对引物的同时参加一个特异性的熒光探針，探針完整时，陈诉基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'-3'外切酶活性将探針酶切降解，使陈诉荧光基团和淬灭荧光基团疏散，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

  TaqMan-MGB探針与普通TaqMan荧光探針相比具有更短的序列和更高的序列特异性，常被用于SNP分型的研究中，有望成为基因诊断和个别化用药阐发的首选技能平台。

  探針法的特点：

  与染料法相比具有更低的配景信号，更高的灵敏度，可以检测低于10个分子的模板，更高的特异性，结果也更准确。同时也具有染料法的操纵简单，不影响酶促反响等优点。

4.客戶需要提供

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5.送樣要求

1、組織樣本在取樣後，迅速放入Trizol或RNA生存液中；

2、細胞請用培養基,Trizol或RNA生存液；

3、RNA生存液生存的樣本可冰袋運輸；其它生存條件請幹冰運輸。

注：捷瑞生物可免費提供RNA生存液，如有需要請聯系銷售員

6.檢測周期
常規檢測任務2－3周內完成，具體時間根據要檢測的基因和樣本數而定

7.報告內容

提供電泳圖片，引物調試與樣本擴增相關圖片（擴增曲線/溶解曲線/標准曲線），定量PCR導出的原始數據，結果的开端彙總阐发以及實驗報告；

熒光定量訂單模板

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